Bawo ni lati ṣe Imudani idena Immunohistomicalmical yii
Fọfeti ti a fi ẹtan salun (PBS) jẹ ojutu ti o nmu ti a nlo fun imunohistochemical (IHC) ati ti o maa n lo ninu iwadi ti ibi. PBS jẹ orisun iyọ ti omi ti o ni sodium hydrogen phosphate, sodium kiloraidi ati, ni awọn igba miiran, potasiomu kiloraidi ati potasiomu hydrohydrogen phosphate.
Immunohistochemical idoti
Immunohistochemistry n tọka si ilana ti wiwa awọn antigens bi awọn ọlọjẹ ninu awọn ẹyin ti apakan apakan nipasẹ lilo awọn ilana ti awọn ẹya ara ti o ni asopọ mọ pato si awọn antigens ninu awọn ohun elo ti ara.
Imuniloluorescent idoti jẹ akọkọ imunohistochemical ti dimu ọna.
Antigens yoo han nigba ti a ba ni idapo pẹlu awọn egboogi nipa lilo wiwa fluorescence nitori iṣiro antigen-antibody binding reaction Igbesẹ yii nwaye nigbati o ba nmu imọlẹ miiwu ti igbẹkẹle kan pato labẹ wiwa microscope fluorescent.
Awọn osmolarity ati awọn iṣiro awọn ifarahan ti awọn iṣeduro baramu awọn ti ara eniyan-wọn isotonic.
Ohunelo fun PBS
O le ṣetan PBS ni ọna pupọ. Awọn agbekalẹ pupọ wa. Diẹ ninu wọn ko ni potasiomu, nigba ti awọn omiiran ni calcium tabi iṣuu magnẹsia .
Yi ohunelo jẹ jo mo rọrun. O jẹ fun ojutu ojutu PX 10X (0.1M). Sibẹsibẹ, o tun le ṣe itọju ọja 1X, tabi bẹrẹ pẹlu ohunelo 10X yi ati ki o ṣe dilute o si 1X.
Gbogbo ilana gba to iṣẹju 10.
Aṣayan kan lati fi Tween jẹ tun pese.
Ohun ti O nilo lati ṣe PBS Fifipamọ
- Sodium fosifeti monobasic (anhydrous)
- Sodium fosifeti dibasic (anhydrous)
- Isodidi iṣuu soda
- Asekale ati ṣe awọn ọkọ oju omi
- O ṣe apanija ati idaniloju igi
- Iwadi pH ti o ni iṣiro ati awọn solusan ti o yẹ fun atunṣe pH
- 1L flaskric flask
- Laarin 20 (aṣayan)
Bi o ṣe le ṣe Salun ti a fi ẹtanu ti afẹfẹ (PBS)
Paarọ 10.9g sodium anhydrous sodium phosphate dibasic (Na2HPO4), 3.2g sodium anhydrous phosphate monobasic (NaH2PO4), ati 90g sodium kiloraidi (NaCl).
Tu ni o kan labẹ omi ti a ti distilled 1L.
Ṣatunṣe pH si 7.4 ki o si ṣe ojutu si iwọn didun ti 1L.
Duro 10X ṣaaju lilo ati ṣatunṣe pH ti o ba jẹ dandan.
O le ṣe igbasilẹ PBS kan ti o ni 0,5 ogorun Si iwọn 20 nipasẹ fifi 5mL kun laarin 20 si 1L ojutu.
Awọn italolobo fun Ṣiṣe PBS Fifipamọ
Tọju abala ni yara otutu lẹhin ti o ti ṣe ilana PBS.
Awọn reagents ti ko ni anhydrous ni a le paarọ ṣugbọn o yoo ni atunṣe ibi ti o yẹ fun ọkọọkan lati gba awọn ohun elo omi ti a fi kun sii.
Awọn lilo ti Felifeti ti a muu ẹdun (PBS)
Fọfeti ti a fi ẹtan salun ni ọpọlọpọ awọn lilo nitori pe isotonic ati kii-majele si ọpọlọpọ awọn sẹẹli. O le ṣee lo lati ṣe awọn ohun elo ti o nro ati ti a nlo nigbagbogbo lati ṣagbe awọn apoti ti awọn sẹẹli. PBS le ṣee lo bi ọna ti o yatọ ni ọna pupọ lati gbẹ awọn ẹmi-eegun nitori pe awọn omi ti o wa ninu rẹ yoo ni ipilẹ ni ayika protein-ẹmi, fun apẹẹrẹ. O yoo wa ni "sisun" ati ki o duro si ilẹ ti o ni agbara.
PH maa duro dada ati ibamu lati dena iparun awọn ẹyin.
Bọtini ti o nipọn ti omi ti o sopọ si nkan na yoo dena idibajẹ tabi awọn iyipada iyipada miiran. Awọn alamu afẹfẹ carbonbon le ṣee lo fun idi kanna ṣugbọn pẹlu agbara diẹ.
PBS tun le ṣee lo lati mu aami ifọkansi kan nigbati o ba ni idiyele eroja amọradagba ni ellipsometry.