A lo Olufokii yii lati ṣe iwadi Ẹrọ DNA
Eyi ni fifa ni agbara kekere ati agbara kekere. O dara julọ fun electrophoresis ti awọn ẹya DNA ti o tobi (> 20 kb) ati pe yoo nilo lati paarọ rẹ nigbagbogbo tabi ti a fi sii fun igba diẹ (> 4 h) awọn akoko fifẹ geli.
Pẹlu pe ni lokan, o le fẹ lati ro ọpọlọpọ awọn batches ti ifibọ.
Funni pe fifun ni o rọrun lati ṣe ati awọn igbesẹ naa le ṣee gbe ni kiakia, ṣiṣe diẹ ẹ sii ju ọkan lọ ni akoko kan ko yẹ ki o jẹ paapa akoko-n gba tabi soro lati fa kuro. Lilo awọn itọnisọna ni isalẹ, o yẹ ki o gba to iṣẹju 30 lati ṣe fifipamọ TAE. Eyi ni bi:
Ṣe iṣeduro ipamọ iṣura ti EDTA
Ẹda EDTA (ethylenediamine tetraacetic acid) a pese ojutu ni iwaju akoko. EDTA ko ni lọ patapata sinu ojutu titi ti a fi tun ṣe atunṣe pH si 8.0. Fun fifita ọja iṣura 500-milliliter ti 0,5 M EDTA, ṣe iwọn 93.05 giramu ti iyọdi disodium EDTA (FW = 372.2). Duro ni omi-omi ti a ti lẹgbẹrún 400-milliliters ati ṣatunṣe pH pẹlu sodium hydroxide (NaOH). Gbe soke ojutu si ipele ikẹhin ti 500 mililiters.
Ọja Up Iṣura Iṣura kan ti Tita
Ṣe iṣeduro iṣowo (50x) ọja ti TAE nipa ṣe iwọn 242 giramu ti Tris mimọ (FW = 121.14) ati tuka rẹ ni to to milionu 750 ti omi ti a fi omi pin.
Fi abojuto fi 57.1 mililiters ti glacial acid ati 100 milliliters ti 0,5 M EDTA (pH 8.0). Lẹhin eyi, ṣatunṣe ojutu si iwọn ikẹhin ti 1 lita. Yi ojutu iṣura ni a le tọju ni otutu otutu. PH ti ifiwadii yii ko ni atunṣe ati pe o yẹ ki o jẹ iwọn 8.5.
Ṣe iṣeduro Solusan Ṣiṣẹ ti TAE
Awọn ojutu ṣiṣẹ ti 1x Tint buffer ti wa ni ṣe nipasẹ nìkan diluting awọn ọja iṣura nipa 50x ni omi dionized.
Awọn ikẹkọ solute solusan jẹ 40 mM. Tris-acetate ati EDTA 1 mM. Ti o ba ti ṣafẹru jẹ ṣetan fun lilo ni ṣiṣe gel agarose.
Ohun ti O nilo fun Imuduro naa
Niwon ṣiṣe fifẹ TAE nikan nilo ilana itọnisọna ti o rọrun ati rọrun, nọmba awọn ohun elo ti o nilo fun o kii ṣe pipadanu. Iwọ yoo nilo iyọdi EDO disodium, Tris base, ati glacial acetic acid.
Ṣiṣe awọn fifun naa tun nilo pH mita ati awọn igbesẹ atunṣe, bi o ti yẹ. Iwọ yoo tun nilo milionu 600 ati awọn beakers milionu 1500 tabi awọn ikun bii awọn olutọju ti o tẹju. Lakotan, iwọ yoo nilo omi ti a fi sinu omi, awọn ọpa fifọ, ati fifa awọn apẹrẹ.
Pipin sisun
Nibo ni o ṣe ipinnu lati ṣe fifa - ni aaye ile-iwe, aaye iṣẹ, tabi ipo miiran, bii ile rẹ? Ṣayẹwo awọn ohun-iṣowo ṣaaju ki o to bẹrẹ lati rii daju pe o ni gbogbo awọn ohun elo ti o loke fun fifa TAE.
Ti o ba fẹ kuku ko ni lati sanwo fun awọn ohun elo, jijade lati ṣe ifibọ ni ita ita ile rẹ ni a ṣe iṣeduro. O le ṣe iṣakoso awọn ohun elo ti o nilo lori ayelujara tabi lọ si ibi-itaja pataki kan fun wọn.